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          猪瘟病毒抗体检测试剂盒检验方法

          日期:2019-02-15浏览:112次

             猪瘟病毒抗体检测试剂盒检验方法
            1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
            2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
            3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
            4.混匀,置37℃反应30分钟。
            5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
            6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
            7.洗涤,同步骤5。
            8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
            9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
            检验结果的解释
            1.样品A值≥0.38为阳性;样品A值在0.2到0.38之间为可疑;样品A值<0.2为阴性。
            2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只抗体水平不足,建议补打相应疫苗。
            试验方法的局限性
            该试验仅作为定性检测猪血清、血浆中猪瘟病毒抗体,根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。
            注意事项
            1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。
            2.用于检测的样品应保持新鲜。
            3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
            4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。
            5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
            6.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
            7.不同批号试剂组分不得混用。
            8.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

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